FITC-Phytohemagglutinin-L (PHA-L), from Phaseolus Vulgaris

FITC標(biāo)記植物血凝素-L（菜豆）

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產(chǎn)品標(biāo)簽

FITC-PHA-L；Rhodamine-PHA-L；植物血凝素（Phytohemagglutinin,PHA）；FITC-LEL；N-Linked Glycans (N-Glycans) N-多聚糖；羅丹明標(biāo)記刀豆蛋白ConA；

產(chǎn)品信息

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產(chǎn)品描述

植物血凝素（Phytohemagglutinin，PHA），多指來源于Phaseolus Vulgaris菜豆屬（紅腰豆）的凝集素，是由4個(gè)亞基通過非共價(jià)鍵結(jié)合形成的四聚體糖蛋白，包含兩種亞基分子，L亞基（白細(xì)胞凝集素）和E（紅細(xì)胞凝集素），L亞基具有白細(xì)胞凝集和高促有絲分裂活性，E亞基具有高紅細(xì)胞凝集和低促有絲分裂活性。因此，這兩種亞基的組合可產(chǎn)生五種異構(gòu)體（L4, L3E1, L2E2, L1E3和E4）。

顧名思義，PHA-L（Phytohemagglutinin-L），是4個(gè)L亞基通過非共價(jià)鍵連接形成的四聚體，經(jīng)色譜純化所得。PHA-L是白細(xì)胞凝集素，具有高促有絲分裂和白細(xì)胞凝集活性，無紅細(xì)胞凝集活性。廣泛用于免疫學(xué)研究，比如用作PBMC的刺激物；用作INF-γ ICS、ELISPOT實(shí)驗(yàn)的陽性對照；或用作順行性神經(jīng)示蹤劑。

本品是FITC標(biāo)記的PHA-L（FITC labeledPhytohemagglutinin-L, FITC-PHA-L），Ex/Em=495/515nm，親和純化所得，基本不含未標(biāo)記的熒光素。建議工作濃度范圍是5-20μg/ml。

產(chǎn)品特性

1. 英文同義名：FITC labeledPhytohemagglutinin-L, from Phaseolus Vulgaris;FITC labeled Phaseolus Vulgaris Leucoagglutinin;PHA-L (FITC);

2. 中文同義名：FITC標(biāo)記的植物血球凝集素-L，來源于菜豆；FITC標(biāo)記的白細(xì)胞凝集素（PHA-L）；

3. 糖類特異性：半乳糖或復(fù)合物結(jié)構(gòu)

4. F/P（摩爾）：3.0-5.0

5. 外觀：溶液（溶于10 mM HEPES, 0.15 M NaCl, pH 7.5, containing 0.1 mM Ca2+, 0.08% sodium azide）

6. 蛋白濃度：2mg/ml

7. Ex/Em：495/515nm

8. 應(yīng)用：IF、糖生物學(xué)

保存與運(yùn)輸方法

保存：2-8℃避光保存，至少1年有效。 

運(yùn)輸：冰袋運(yùn)輸。

應(yīng)用示例

文獻(xiàn)來源：Winston Y. Lee et al. The Role of cis Dimerization of Signal Regulatory Protein α (SIRPα) in Binding to CD47. J Biol Chem. 2010 Dec 3; 285(49): 37953–37963. PMID: 20826801

【實(shí)驗(yàn)應(yīng)用】：使用PHA-L-FITC（MP6323-2MG）評估N-連接糖基化的減少程度。

【實(shí)驗(yàn)方法】：為了抑制N-連接聚糖的生成，長滿的CHO細(xì)胞用含衣霉素（Tunicamycin，5 μg/ml）的新鮮培養(yǎng)基處理18h。為了停滯N-連接聚糖的成熟，未長滿的CHO細(xì)胞用含幾夫堿（Kifunensine，10 μg/ml）的新鮮培養(yǎng)基處理，直至細(xì)胞長滿后，用PHA-L-FITC（MP6323-2MG）進(jìn)行交聯(lián)分析和流式分析來評估N-連接糖基化的減少程度。

文獻(xiàn)來源：Kristyna Skrenkova et al. N-Glycosylation Regulates the Trafficking and Surface Mobility of GluN3A-Containing NMDA Receptors. Front Mol Neurosci. 2018; 11: 188.

【實(shí)驗(yàn)應(yīng)用】：使用PHA-L-TRITC（MP6324-2MG）和Rhodamine-Con A（MP6322-5MG）評估N-連接糖基化的抑制是否會(huì)影響含GluN3A的N-甲基-D-天冬氨酸受體（NMDARs）的表面遞送。

【實(shí)驗(yàn)方法】：COS-7細(xì)胞用含或不含抑制劑孵育2天，包括衣霉素（1 μg/ml），DNJ（200 μg/ml, α-葡萄糖苷酶I-II抑制劑），幾夫堿（5 μg/ml, ER α-甘露糖苷酶I抑制劑）, DMM（200 μg/ml, ER α-甘露糖苷酶I-II抑制劑）, 苦馬豆素（100 μg/ml，GA α-甘露糖苷酶II抑制劑）。用溶于封閉液的羅丹明標(biāo)記的刀豆蛋白和PHA-L（20 μg/ml）孵育5min。之后細(xì)胞清洗，用4% PFA固定20min，之后用抗熒光淬滅劑封片。

注意事項(xiàng)

1. 本品為熒光標(biāo)記的PHA-L，不適合用于順行神經(jīng)追蹤研究。若要進(jìn)行本研究，請選擇未標(biāo)記的PHA-L（貨號(hào)：MP6301-5MG）。

2. 我司還提供羅丹明標(biāo)記的PHA-L（貨號(hào)：MP6324-2MG），Ex/Em=550/575nm，呈紅色熒光。

3. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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 — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

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FITC標(biāo)記植物血凝素-L（菜豆）蛋白純化FITC標(biāo)記植物血凝素-L（菜豆）蛋白純化